近年來(lái)，TLRs在皮膚病中的作用也越來(lái)越受到關(guān)注，尤其是感染性皮膚病、過敏性皮膚病和自身免疫性皮膚病。

TLRs的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

1.TLRs的分子結(jié)構(gòu)特點(diǎn):TLRs是細(xì)胞膜表面Ⅰ型跨膜蛋白，由富含亮氨酸重復(fù)序列的胞外區(qū)、單一跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)3部分組成。胞外段識(shí)別病原體及其產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)差異大，主要包括十幾至二十幾個(gè)串聯(lián)的富亮氨酸重復(fù)基序，其間有非亮氨酸重復(fù)基序(LRR)序列分隔，亮氨酸重復(fù)基序一般由24個(gè)氨基酸組成，主要是有利于促進(jìn)蛋白質(zhì)間的相互黏附，因而認(rèn)為可用來(lái)識(shí)別病原體及其產(chǎn)物。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)了許多TLR的配體，這些配體中絕大多數(shù)屬于PAMP(病原體相關(guān)分子模式)，而一些非PAMP和PAMP一樣也可誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)等宿主防御反應(yīng)。當(dāng)然，不同的受體通過不同的配體激活，如TLR2主要識(shí)別肽聚糖、脂磷壁酸、脂阿拉伯甘露聚糖、脂蛋白/脂肽、細(xì)菌DNA、支原體的巨噬細(xì)胞活化脂肽，TLR3主要識(shí)別雙鏈RNA，TLR4主要識(shí)別脂多糖、人類和衣原體的熱休克蛋白60，TLR5主要識(shí)別細(xì)菌鞭毛蛋白，TLR9則主要識(shí)別細(xì)菌DNA中的以甲基化胞嘧啶鳥嘌呤為基元構(gòu)成的特定核苷酸序列結(jié)構(gòu)(CpG)基序。TLRs胞內(nèi)區(qū)由羧基端長(zhǎng)短不同的短肽和與IL－1R同源的區(qū)域組成，被稱為Toll樣受體/IL－1同源結(jié)構(gòu)域(Toll/IL－1receptorhomolo-gousregion，TIR)［6］，最近發(fā)現(xiàn)IL－18受體亦具類似胞內(nèi)段結(jié)構(gòu)，胞內(nèi)區(qū)是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的核心元件。TLRs主要分布于淋巴組織、白細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞等細(xì)胞表面，不同的TLRs在非淋巴組織也有不同程度的表達(dá)。TLRs精細(xì)的結(jié)構(gòu)與廣泛的表達(dá)是其發(fā)揮生物學(xué)作用的必要條件。

2.TLRs的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路:目前研究發(fā)現(xiàn)，TLRs的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑至少有兩條［7］，髓樣分化因子MyD88(myeloiddifferentiationfactor88，MyD88)依賴途徑;TLRs介導(dǎo)的主要是經(jīng)過MyD88轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號(hào)途徑，稱MyD88依賴途徑，其他則稱作MyD88非依賴途徑。目前研究較多的是MyD88依賴途徑，PAMPs作用于TLRs，信號(hào)經(jīng)胞內(nèi)段的TIR結(jié)構(gòu)域與MyDB8結(jié)合，MyD88進(jìn)一步與IL－1受體相關(guān)激酶(IRAK)的死亡結(jié)構(gòu)域作用，磷酸化的受體相關(guān)激酶與另一接轉(zhuǎn)蛋白腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)形成復(fù)合物;TRAF6通過接轉(zhuǎn)蛋白TAB激活激酶TAK－1，進(jìn)而作用于κB與核因子κB(NF－κB)，NF－κB的激活可導(dǎo)致若干促炎細(xì)胞因子的合成與釋放。TRAF6還可通過另一途徑，作用于MAP激酶MEKK－1(mitogenandextracellularkinasekinase－1，MEKK－1)，經(jīng)p38激活Jun/Fos，最終均可激活免疫應(yīng)答基因［8，9］。非MyD88依賴途徑銜接的蛋白包括TRIF(TIR－domaincontainingadaptorinducingIFN－β)和TRAM(TRIF－relatedadaptormolecul)，TRIF是TLR3和TLR4信號(hào)傳導(dǎo)所必需的銜接蛋白，能誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子和干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF－3)，以及隨后樹突狀細(xì)胞的成熟和活化［10，11］。MyD88依賴途徑中主要涉及TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7及TLR9等。而TLR3和TLR4介導(dǎo)的干擾素調(diào)節(jié)因子3的活化主要是通過MyD88非依賴性的方式。

TLRs在皮膚病中的作用

1.感染性皮膚病

1)細(xì)菌感染性皮膚病當(dāng)外界病原微生物如革蘭陽(yáng)性菌、革蘭陰性菌等通過皮膚侵襲入機(jī)體時(shí)，皮膚中的單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等通過其表面表達(dá)的TLRs與病原體的PAMP結(jié)合刺激后，合成并釋放IL－1、IL－6、IL－8、IL－2、TNF－α、IFN－γ等大量細(xì)胞因子及抗菌肽防御素(HBD)，在早期殺滅病原微生物，發(fā)揮機(jī)體的防御屏障功能。此外，TLR的活化可誘導(dǎo)一氧化氮合成酶的轉(zhuǎn)錄活性，產(chǎn)生一氧化氮，觸發(fā)胞內(nèi)殺菌機(jī)制，使細(xì)菌感染的巨噬細(xì)胞凋亡，通過細(xì)菌在入侵部位的局部死亡限制細(xì)菌的擴(kuò)散。Krutzik［12］等發(fā)現(xiàn)TLR2/1的異質(zhì)二聚體被麻風(fēng)分支桿菌激活，結(jié)核樣型麻風(fēng)患者皮損處TLR1及TLR2高表達(dá);相反瘤型麻風(fēng)皮損處TLR1和TLR2表達(dá)缺失，表明TLRs主要在結(jié)核樣型麻風(fēng)中起作用。Kang等［13］分別比較了瘤型麻風(fēng)患者、結(jié)核樣麻風(fēng)患者和正常人的TLR2構(gòu)象，發(fā)現(xiàn)結(jié)核樣麻風(fēng)患者和正常人的TLR2的構(gòu)象未發(fā)生突變，TLR2的構(gòu)象突變僅發(fā)生在瘤型麻風(fēng)患者，這提示TLR2的突變使得機(jī)體易患瘤型麻風(fēng)。并發(fā)現(xiàn)TLR2突變的瘤型麻風(fēng)患者外周血單核細(xì)胞分泌IL－2、IL－12、IFN－γ和TNF－α的能力下降，這也是瘤型麻風(fēng)細(xì)胞免疫反應(yīng)低下的原因之一。

2)病毒感染性皮膚病人漿細(xì)胞型樹突狀細(xì)胞(pDC)膜表面表達(dá)的TLR7、TLR9接受病毒PAMP刺激后，產(chǎn)生Ⅰ型干擾素(IFNα/β)，Ⅰ型干擾素是抗病毒作用的重要效應(yīng)物質(zhì)，Dai等［14］研究發(fā)現(xiàn)，脂多糖以及單純皰疹病毒均能上調(diào)pDC的干擾素調(diào)節(jié)因子－7基因的表達(dá)，并且干擾素調(diào)節(jié)因子－7基因的上調(diào)與核因子－κB的激活有關(guān)。Ash-kar［15］等發(fā)現(xiàn)將CpG－ODN(寡核苷酸)導(dǎo)入生殖道黏膜不僅能趨化大量的炎癥細(xì)胞到黏膜下，而且能抑制局部2型單純皰疹病毒的復(fù)制，表明CpG－ODN能通過TLR(TLR3、4、9)引起局部強(qiáng)烈的先天免疫并呈現(xiàn)有效的抗病毒免疫效應(yīng)。Wenzel等［16］證實(shí)咪喹莫特主要通過TLR7介導(dǎo)Ⅰ型干擾素的生成，從而發(fā)揮抗病毒效應(yīng)。這些TLRs重要的生物學(xué)作用為抗病毒治療提供了一條新思路。

3)真菌感染性疾病目前，白念珠菌和曲霉菌的TLRs在固有免疫機(jī)制中的作用研究比較深入，真菌菌壁上的葡聚糖、甲殼素和多種菌壁酶等有可能是PAMP，TLR2、TLR4和TLR6與其結(jié)合，通過MyD88途徑激活巨噬細(xì)胞的核因子－κB的轉(zhuǎn)錄。近年來(lái)，由念珠菌屬引起的人類皮膚黏膜感染正在逐漸升高，病情嚴(yán)重者可以累及全身各系統(tǒng)。國(guó)外已有研究證明:TLR2和TLR4在宿主抗白念珠菌機(jī)制中起重要作用，TLR2和TLR4基因敲除的鼠對(duì)白念珠菌的易感性明顯增加［17，18］。Vander等［19］研究顯示外周血單核細(xì)胞通過不同的TLRs誘導(dǎo)產(chǎn)生不同的細(xì)胞因子，白念珠菌的孢子由TLR4介導(dǎo)產(chǎn)生IFN－γ，菌絲由TLR2介導(dǎo)產(chǎn)生IL－10。這提示TLRs不僅參與真菌識(shí)別，而且白念珠菌的不同形態(tài)由不同的TLRs傳導(dǎo)炎癥信號(hào)通路，引起機(jī)體的不同反應(yīng)，并推測(cè)TLR可能與白念珠菌菌絲的免疫逃逸有關(guān)。目前研究已證實(shí)TLR2和TLR4在樹突狀細(xì)胞識(shí)別曲霉過程中起到重要作用，TLR2和TLR4基因敲除的鼠對(duì)曲霉菌易感性增加，且MyD88缺陷的小鼠對(duì)曲霉菌的易感性也增強(qiáng)，同時(shí)中性粒細(xì)胞的吞噬能力受損，這提示MyD88依賴性TLR途徑在曲霉菌的固有免疫中發(fā)揮著重要的作用［20］。曲霉的分生孢子可通過TLR2和TLR4刺激人單核細(xì)胞產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子TNF－α及IL－1的分泌，而菌絲中能通過TLR2刺激單核細(xì)胞產(chǎn)生這些細(xì)胞因子，由此推測(cè)曲霉菌絲可能通過TLR逃避固有免疫系統(tǒng)識(shí)別，而該菌體在感染中的表型轉(zhuǎn)換則可能是它的一種逃避機(jī)制［21］。