試論單胺氧化酶的研究進(jìn)展

　　【摘　要】近年來，關(guān)于單胺氧化酶在臨床上的應(yīng)用研究越來越受到人們的關(guān)注，本文將對其理化性質(zhì)、檢測方法及臨床應(yīng)用作一綜述。

　　【關(guān)鍵詞】單胺氧化酶;研究進(jìn)展

　　1　MAO理化性質(zhì)單胺氧化酶(Monoamine oxidase，MAO)的分類名為單胺：氧氧化還原酶，是含F(xiàn)e2+、Cu2+和磷脂的結(jié)合酶，主要作用-CH2NH2基團(tuán)催化各種單胺類脫胺生成相應(yīng)的醛，然后進(jìn)一步氧化成酸;或使醛轉(zhuǎn)化為醇再進(jìn)一步代謝。MAO是一種上具多個(gè)結(jié)合部位的單一分子酶，故對底物的特異性不高，可使多種胺類氧化脫氨。MAO廣布于體內(nèi)各組織器官，尤以肝、腎、胃和小腸含量最多，主要位于線粒體膜外表面，并與膜緊密結(jié)合，以黃素腺嘌呤二核苷酸為輔酶;另一類存在于結(jié)締組織，不含F(xiàn)AD，以磷酸吡哆醛為輔酶。

　　腦組織中的MAO隨年齡增加、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的增多其活性增強(qiáng)。MAO能分解兒茶酚胺類激素，可間接反映心臟交感神經(jīng)結(jié)功能。現(xiàn)已證實(shí)，不同來源的MAO的相對分子質(zhì)量相差很大，小者約100，000，大者可達(dá)1，000，000以上，是由于同一亞基的聚合程度不同所致。

　　2　MAO實(shí)驗(yàn)室檢測方法

　　最早檢測MAO是用熒光測定法[1]和醛偶氮萘酚法，目前常用方法包括以下幾種。

　　2.1　醛苯腙比色法　該方法通過MAO氧化芐胺，再與2，4二硝基苯肼作用生成的醛苯腙在堿性條件下產(chǎn)生棕紅色，于470nm比色測定，計(jì)算MAO的濃度。

　　2.2　MCDP比色法　該法是通過MAO氧化芐胺產(chǎn)生過氧化氫，過氧化氫在過氧化物酶存在下與MCDP作用生成有色的甲烯藍(lán)，于660nm處比色測定，計(jì)算MAO的濃度。此法需要加入終止液后測定，不宜于大批量標(biāo)本的檢測，而且MCDP見光易分解。

　　2.3　連速監(jiān)測法　該方法是通過MAO催化芐胺生成氨，氨在α-酮戊二酸、NADPH和GLDH的存在下生成谷氨酸，同時(shí)NADPH還原成NADP+，引起340nm處吸光度的下降，通過監(jiān)測其下降的速率即可得出樣本中MAO的活性。此方法快捷、操作簡單、適合自動化分析，可減少人為誤差，具有良好的準(zhǔn)確度與精密度，適合大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。

　　3　MAO測定的臨床應(yīng)用

　　3.1　血清單胺氧化酶活性高低能反映肝纖維化的程度，是診斷肝硬化的重要指標(biāo)。肝硬化病人MAO活性升高的陽性率在80%以上，最高值可達(dá)對照值的3.5倍(n=30)。酶活性與腹腔鏡所見肝表面的結(jié)節(jié)變化，以及與活組織鏡檢所見的纖維化程度相平行。纖維變僅限于匯管區(qū)或小葉中心者，其MAO活性大致正常;纖維變侵入肝實(shí)質(zhì)內(nèi)時(shí)，MAO升高率為30%;匯管和匯管區(qū)之間有架橋性纖維化時(shí)，則有83%升高;如在假小葉周圍有廣泛纖維化形成時(shí)，則幾乎全部均升高，且升高幅度最大。國內(nèi)報(bào)道陽性率均在85%(天津公安醫(yī)院：17例，88%，高璣山等：32例，85.7%;薛德義等：71例，87.05%;黃澤倫：20例，85%;劉覽等：30例，86.7%)，其升高幅度及陽性率均超過急性或慢性肝炎。同工酶分離證實(shí)，慢性肝病SMAO-III有增高趨勢;肝硬化代償組MAO-III占總活性的(23.9+3.0)%，其陽性率為72.2%(13/18);肝硬化失代償組MAO-III占總活性的(34.6+4.0)%，其陽性率為92.3%，故檢測MAO同工酶有助于肝硬化的早期診斷。

　　雖然肝硬化時(shí)，結(jié)締組織纖維釋放MAO增多，但在纖維化甚為明顯的血吸蟲肝病，患者SMAO并不一定升高，故纖維化并非MAO活性升高的唯一原因。現(xiàn)已知大動脈和肺組織內(nèi)MAO的濃度比血清高100-150倍，血中MAO可能部分來自血管內(nèi)皮細(xì)胞。肝硬化時(shí)，病人體內(nèi)的水分增加，末梢擴(kuò)張和高動力型循環(huán)等有可能促使血管壁內(nèi)MAO釋放人血。由于胃腸組織也含有豐富的MAO，因此門-體靜脈短路時(shí)，腸內(nèi)MAO可經(jīng)短路進(jìn)入體循環(huán)。

　　3.2　各型肝炎：各型肝炎急性期患者的MAO活性多數(shù)不升高，但在暴發(fā)型重癥肝炎時(shí)，因肝細(xì)胞壞死，線粒體釋放大量的MAO，可致MAO活性升高，陽性率可達(dá)73.3%，其升高幅度與病情輕重程度成正相關(guān);急性肝炎經(jīng)久不愈，病程超過3個(gè)月者，MAO活性亦可升高;活動型慢性肝炎有半數(shù)左右病例MAO活性升高。肝炎與肝硬化病人MAO活性差別顯著，而各型肝炎之間的MAO活性無顯著差異。

　　3.3　糖尿病可因合并脂肪肝，充血性心力衰竭可因肝郁而繼發(fā)肝纖維化，以至人MAO活性增高;甲狀腺功能亢進(jìn)可因纖維組織分解與合成旺盛，肢端肥大癥可因纖維過度合成等原因，從而引起MAO活性不同程度的升高。有些無纖維增生的結(jié)締組織疾病的病人MAO活性不升高。原發(fā)性肝癌、繼發(fā)性肝癌、畸胎瘤、膽汁性肝硬化、血吸蟲性肝硬化、慢性膽汁郁積型肝炎等患者的SMAO活性不變。

　　測定血小板MAO活性發(fā)現(xiàn)，正常對照組女性大于男性。

　　慢性精神分裂癥患者血小板MAO活性明顯低于正常組，而急性精神分裂癥與對照組無明顯差別，但抗精神病藥物能引起MAO活性升高。雙向情感性障礙患者，血小板MAO活性顯著低于對照組，且男性低于女性;躁狂型患者顯著低于抑郁型患者患者，單相抑郁癥患者顯著公共開支對照組。但美國學(xué)者最近研究認(rèn)為，血小板MAO活性與精神病學(xué)檢查結(jié)果沒有明顯關(guān)系。酒精中毒者男性血小板MAO與女性有明顯差異。

　　此外，測定腫瘤組織勻漿MAO和二胺氧化酶的活性，有助于區(qū)別前腸和中腸的類癌瘤腫瘤，前腸類癌腫組織中MAO活性[(1850+342)mol/mg.min，n=16]明顯高于中腸類癌腫瘤[(407+43)mol/mg.min]。